限制性内切酶识别位点

无论是构建克隆载体还是表达载体,要根据载体选择合适的内切酶。先将引物设计好,然后将酶识别序列加到引物5′ 端。常用的内切酶比如BamH I、EcoR I等可能你都已经记住了它们的识别序列,不过为了保险起见,还是得查证一下。

要查找限制性内切酶的识别位点,可以选择下面几种途径:

1. 所使用的内切酶的公司的目录或者网站;

2. 用软件如:Primer Premier或Bioedit等,这些软件均提供了内切酶识别序列的信息;

3. 到NEB的REBASE数据库去查(网址:http://rebase.neb.com/rebase/rebase.html

当你设计好引物,添加上了内切酶识别序列,下一步或许是添加保护碱基了。

31. 三月 2012 by admin
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